Генная терапия – относительно новое направление в современной медицине. Современная биомедицинская наука претендует на лечение ряда заболеваний, в том числе наследственных, на генном уровне. Идея довольно проста – если в клетках организма один из генов дефектен, то надо доставить туда туда "правильную версию" этого гена и заставить ее работать...
Работа в этом направлении ведется уже лет двадцать пять. Для доставки генов используюся как вирусные, так и невирусные носители. К сожалению, емкость векторов ограничена (то есть ограничен размер гена, который можно вставить в вирусную конструкцию или плазмиду), и это очень досадный факт. Например, миодистрофия Дюшена вызвана мутацией в гене дистрофина. А ген дистрофина просто огромен, его ни в вирус, ни в плазмиду целиком не вставишь.
Что делать в такой ситуации? Один из возможных "трюков" -- ввести ген по частям, так, чтобы эти части потом объединились. Именно в этом направлении работают Акрасубха Гхош, Йон Пхин Юэ и Доншен Дуань из Университета Миссури. Они "разбили» ген бета-галактозидазы и ген алкалинфосфортазы на две части (части перекрываются, а не следуют друг за другом) и вставили эти части в вирсные вектора. Американцы использовали аденоассоциированные вектора разных серотипов.
Затем они трансдуцировали (попросту говоря, заразили) мышечную ткань и слетные миобласты такой конструкцией. На самом деле, для каждого из генов это получается как бы смесь двух разных конструкцией. Существенный момент – то, что два разных "куска гена" имеют перекрывающийся участок. Если с каждого такого "куска гена" начнется считывание информации, то получатся две молекулы РНК, и в результате сплайсинга они могут обменяться кусками и образовать вполне нормальну информационную РНК, с который и синтезируется нужный белок.
В общем, в работе, опубликованной в свежем номере Gene Medicine, Дуань и его группа показали, что с помощью такого подхода можно вносить нужный ген в скелетные мышцы и в клетки миобластов in vitro получить экспрессию такого гена. Ученые продемонстровали экспрессию в мышцах и миобластов при заражении смесью двух конструкций с перекрывающимися частями гена. Эффективность трансдукции, правда, меньше, чем у той же вирусной конструкцией, но с целым геном.
Источник новости: Ghosh A, Yue Y, Duan D. Viral serotype and the transgene sequence influence overlapping adeno-associated viral (AAV) vector-mediated gene transfer in skeletal muscle. J Gene Med. 2005 Dec 29; [Epub ahead of print]
Пересказал А.Ермаков